TLC上的位置,除了分子的极性外,也得考虑TLC的性质,是硅胶、氧化铝或树脂，因为不同的TLC与分子的作用是不同的，硅胶上有很多羟基，你的物质是通过与硅胶形成氢键-洗脫-再形成氢键这样在板上移动的，这时极性大的物质与硅胶作用强，体现在TLC上就是位置靠下。但对某些树脂，是通过疏水作用与你的分子作用的，极性大的树脂对其吸附作用反而小，体现在TLC上是位置靠上。
另外，还得考虑一个展开剂的性质，如果是两个物质极性相差较小，不同的展开剂（极性及其它性质），即使在同一种TLC上，展开后的位置也会有变化。我曾经遇到过这样的例子，两个分子用硅胶板在不同的展开条件下，展开后其前后位置竟颠倒了。如果分子的极性相差很大，比如一个是盐，一个是中性分子，那只要在同一种TLC上，比如硅胶，展开后总是盐在后（一般在原点不动），中性分子在前。但如果极性相差不大，那各种影响因素都得考虑。
展开剂的极性，在硅胶板上，极性大的展开剂会把同一种物质推得更靠前。甲醇的极性比乙腈大，但前面已说过，展开过程非常复杂，这并不是唯一的考虑。
通常情况是这样，但也有例外，如说到：‘比如一个是盐，一个是中性分子，那只要在同一种TLC上，比如硅胶，展开后总是盐在后（一般在原点不动）’，我做过个杂环芳胺，其盐酸盐和游离胺在同一种TLC上的Rf值是一样的，可能是特例，基本同意。
TLC时大家总喜欢谈极性的问题,我从不考虑谁的极性大谁的极性小,我只看谁跑在上面谁跑在下面!过柱子时Rf值大的先出来,Rf值小的后出来!管它极性大小!
一般是对同一个样品，展开剂的极性越大，被展开的物质爬的越快。
硅胶板一般属于正相系统，固定相极性大，展开剂极性小，所以被分离物质在传统的硅胶TLC中，跑的快的是极性较小的，跑的慢的是极性较大的
不管是TLC还是HPLC，物质跑的快慢都与物质本身及流动相的极性相关，物质的极性与流动相的极性越接近，越跑的快。
两者极性相近结构形似，选展开剂时这两个物质总是离得很近，则要减少极性，爬到头后，吹干，继续爬板。重复几次就能分开.
大家谈谈平时TCL时的经验，虽说爬板分离是很普通的一件事，却有很多注意的地方：
点样时浓度要调节适当，点样时样品点不要过大，展开剂的液面不要没过点的样；
点样大小，浓度要把握好，有是需要的话，可以点2个点；
点样的高度，一般选择1cm左右；
点板时要选择合适的展开剂，RF选择在0.4-0.5左右（个人意见），如果是两个点或多个点时，RF2-RF1>0.1左右；
展开剂最好是现配，不要搁置太久。
